谷胱甘肽S-转移酶(GST)代测检测服务
测定意义: GST 是一种具有多种生理功用的蛋白质家族,主要存在于细胞质内。GST 是体内解毒酶系统的重要组成局部,主要催化各种化学物质及其代谢产物与 GSH 的巯基共价分离,使亲电化合物变为亲水物质,易于从胆汁或尿液中排泄,到达将体内各种潜在或具备毒性的物质降解并排出体外的目的。因而,GST 在维护细胞免受亲电子化合物的损伤中发挥着重要的生物学功用。此外,由于 GST 具有 GSH-Px 活性,亦称为 non-Se GSH-Px,具有修复氧化毁坏的大分子如 DNA、蛋白质等的功用。留意,GST 催化的反响减少 GSH 含量,但是不增加GSSG 含量。
谷胱甘肽S-转移酶(GST)测定原理:
GST催化GSH与CDNB分离,其分离产物的光吸收峰波长为340nm;经过测定340nm 波优点吸光度上升速率,即可计算出GST活性。 一、样品测定的准备: 称约0.1g组织,参加1ml试剂一,冰上充沛研磨,10000rpm4℃离心10min,取上清(如上清不明澈,再离心3min)。 二、GST测定操作 1、混合试剂配制:将试剂二与试剂一按1:8混合。 2、试剂三放在25℃预温。 3、分光光度计调到340nm处,设定时间为5min,用双蒸水调零。 4、取0.1ml样品与0.9ml混合液混合,于25℃预温5min,再参加试剂三0.1ml,疾速混匀,于340nm处测定5min内吸光值的变化,第0s的吸光值记为A1,第300s的吸光值记为A2。 5、空白管测定为操作4中以0.1ml试剂一替代0.1ml样品液。
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