氧化型谷胱甘肽(GSSG)含量测定 测定意义 GSH/GSSG是细胞内最重要的氧化复原对之一。因而,测定细胞内GSH和GSSG含量以及GSH/GSSG比值,可以很好地反映细胞所处的氧化复原状态,也是谷胱甘肽氧化复原循环的主要指标之一。 测定原理:应用2-VP法测GSSG含量。 需求的仪器:耗材:低温离心机、水浴锅、可调理移液器、可见分光光度计/酶标仪、微量玻璃比色皿/96孔板、和蒸馏水。 GSSG含量计算 依据规范曲线,将样品△A带入公式中(x),计算出样品浓度y(μg/mL)。 (1)按蛋白浓度计算 GSSG(μg/mgprot)=yXV样十(V样XCpr)=y+Cpr (2)按样实质量计算 GSSG(ug/g鲜重)=yXV样+(V样+V样总XW)=y六W (3)按细胞数量计算 GSSG(μg/10'cell)=yXV样+(V样+V样总X细胞数量)=y六细胞数量 (4)按液体体积计算 GSSG(μg/mL)=2y V样总:上清液总体积,1mL;. V样:参加反响体系中上清液体积,100μL=0.1mL; W:样质量量,g; Cpr:.上清液蛋白质浓度,mg/mL; 细胞数量,以10°为单位计量; 血浆(血细胞)稀释一倍。
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