γ-谷氨酰半胱氨酸衔接酶（GCL） 品牌：优玄生物 类别：代测服务 - LC-MS法 规格：暂无   预约待测

    γ-谷氨酰半胱氨酸衔接酶（GCL）

    测定意义：

    GCL是GSH合成的限速酶，GSH对GCL有反应抑止作用。GCL基因表达受多种要素调理，如氧化剂、抗氧化剂、生长因子和炎症因子等。GCL活性上下对GSH含量和GSH/GSSG比值有重要影响。

    测定原理：

    在ATP和Mg2+存在下，GCL催化谷氨酸和半胱氨酸合成γ-谷氨酰半胱氨酸；同时ATP去磷酸化产生无机磷分子，经过测定无机磷增加速率，即可计算出GCL活性。

    GCL测定操作

    1.分光光度计预热30min，调理波长到660nm，蒸馏水调零。

    2.2.空白管：取1.5mLEp管，依次参加试剂一240µL、试剂二260µL、试剂三60µL和蒸馏水120µL，混匀后盖紧，37℃水浴精确反响15min；再参加试剂四300µL，混匀后，25℃、8000g，离心10min，取上清500µL，参加试剂五500µL，混匀后盖紧，45℃水浴10min，冷却后测定660nm处吸光值，记为A空白管。

    3.3.测定管：取1.5mLEp管，依次参加试剂一240µL、试剂二260µL、试剂三60µL和上清液120µL，混匀后盖紧，37℃水浴精确反响15min；再参加试剂四300µL，混匀后，25℃、8000g，离心10min，取上清500µL，参加试剂五500µL，混匀后盖紧，45℃水浴10min，冷却后测定660nm处吸光值，记为A测定管。